Laboratorio de Pequeños Animales: Otras areas

En el laboratorio de pequeños animales encontramos otros equipos y áreas del laboratorio clínico que incluyen un laboratorio de inmunología,quimica clinica y   el area de almacenamiento de reactivos y elementos biologicos. 

Almacenamiento de Reactivos

Refrigerados:   pueden ser líquidos o secos para realizar diversos procedimientos como las pruebas químicas.    Se mantienen en la nevera de reactivos

Temperatura ambiente:   se mantienen almacenados y divididos según el procedimiento en que sean empleados en gabinetes

Se observó que todos están debidamente rotulados.

Nevera biológicos:   se mantienen las muestras aproximadamente por un mes, se clasifican según su uso, es decir, cuadros hemáticos, química sanguínea, pilas, entre otros, por ejemplo se separa anemia infecciosa, Leptospiras y sueros de la clínica que se remiten a otros laboratorios.   

      Hoja de control:   las dos neveras presentan una, contiene la fecha, y temperatura de mañana y tarde

 Teniendo en cuenta esto es importante aclarar las normas técnicas de refrigeración:

•      Mantenimiento

•      Control de temperatura

•      Regulación de la temperatura

•      Flujo de aire dentro de la nevera

Se debe tener en cuenta que:

•  Debe estar ubicada en la sombra y lejos de toda fuente de calor, nivelada, a 15 cm de la pared
•  Debe tener un termómetro específico, en la mañana y tarde se debe verificar la temperatura la cual debe registrarse en la hoja de control 
•  Se deben separar las muestras que llegan permanentemente y las que ya permanecieron dentro de él.                                    
  Computador:   en el se digitan los resultados, contiene un formato para cada especie animal, en este caso por caninos, felinos, equinos, bovinos, ovinos y caprinos, aves y reptiles, entre otros

Área de coloración:    

• Agua destilada:   se emplea como buffer en las coloraciones

 

 

VD Electronics:   equipo para uroanálisis

 Baño serológico:   se mantiene a 37ºC

RA 50:   equipo que monta químicas usando reactivos en líquido, realiza pruebas colorimétricas y enzimáticas

Stat Fax 3300:   monta las químicas con los reactivos del mismo equipo, depende si es de tipo colorimétrico o enzimático.   En éste caso se emplea para montar químicas sanguíneas, incluye glucosa, lípidos totales, triglicéridos, hemoglobina, sodio, lactato, proteínas totales, colesterol, cloro, inmunoglobulina, fosfatasa, AST, bilirrubina, GGT,  hemoglobina II, creatinina, CK total, ALT, bilirrubina directa, albumina, urea.  

 

 

DTSC II Module:   se encarga de pruebas químicas como AST, GGT, urea, albuminas, creatinina, electrolitos

 

Otros equipos:   

Área de lavado: 

 

Laboratorio de inmunología:    

 

Laboratorio de Pequeños Animales: Bioseguridad y Control de Calidad

Con respecto a la bioseguridad y control de calidad, encontramos que:

Calibración de equipos:    

En el laboratorio clínico los equipos son de vital importancia, su mantenimiento se debe realizar periódicamente. La finalidad que tiene es de carácter preventivo y calibración, es decir, debe cumplir con los requisitos de control de calidad y junto al mantenimiento correctivo quedara registrado en la hoja de vida del equipo.   Todos estos procedimientos deben ser garantizados por el proveedor del equipo durante la vida media del mismo.   

En éste caso el laboratorio la realiza cada seis meses, es solicitada a la casa comercial de cada equipo

Bioseguridad:    en el laboratorio clínico es clave mantener una serie de reglas para evitar ciertos riesgos que pueden causar diversos daños tanto al personal como en el procesamiento de las muestras:

• Lavado de manos antes y después de cualquier procedimiento
• Lugar de trabajo en óptimas condiciones de higiene y aseo, mantener las superficies desinfectadas con hipoclorito de sodio al 10%
• No guardar alimentos en las neveras o equipos de refrigeración
• No se debe comer, beber, fumar, ni aplicarse cosméticos
• No se debe tener contacto de la boca con diversos utensilios, ni se debe pipetear con ésta
• No se deben manipular elementos contaminados con sangre
• En cada uno de los residuos del laboratorio deben descartarse en el recipiente indicado
• En el procesamiento de las muestras se debe evitar la salpicadura, aerosoles o contaminación con gotas
• El personal debe portar:   bata de manga larga, guantes, protectores para ojos, tapabocas

En éste caso en el laboratorio se evidencio un cumplimiento de todas las reglas excepto por las barreras de protección primarias, específicamente del uso de guantes al momento de la toma de muestra por la complejidad de su uso en animales con pelaje, ya que en éstos es muy difícil palpar la vena.

En el caso del manejo de residuos hospitalarios tenemos la siguiente clasificación:

1.    Residuos no peligrosos

a. Biodegradables

b.    Reciclables

c.    Inertes

d.    Ordinarios o comunes

2.     2.  Residuos peligrosos

a.    Residuos infecciosos o de riesgo biológico

                                          i.   Biosanitarios

                                          ii.  Anatomopatológicos

                                          iii. Cortopunzantes

                                          iv.    Animales

b.    Residuos químicos

                                          i.    Fármacos parcialmente consumidos, vencidos y/o deteriorados

                                          ii    Citotóxicos

                                          iii   Metales pesados

                                          iv.   Reactivos

                                          v.    Contenedores presurizados

                                          vi.  Aceites usados

c.    Residuos radiactivos

Teniendo en cuenta esto se observo en el laboratorio uso de guardianes para metales, vidrio y madera, cada uno debidamente marcado.   Por otro lado en el manejo de residuos sólidos  se evidencio el uso de:

• Bolsa gris:   encargadas del reciclaje, plástico, bolsas de polietileno, vidrio, cartón, papel, periódico, botellas

 

 

• Bolsa roja:   material infeccioso, residuos sólidos con alto nivel de contaminantes, gasas, algodón, guantes de látex y caucho

Hay una amplía señalización con el fin de prever futuros accidentes, de la siguiente forma:

Control de Calidad:  

Control de Calidad Interno:   está encargado de detectar posibles errores en el procesamiento de la muestra desde que esta se obtiene hasta la entrega del resultado, con el fin de aumentar la competitividad y eficiencia del laboratorio.   Maneja tres fases

1. Fase pre analítica
2. Fase analítica
3. Fase pos analítica

Se determina al correr la muestra con los controles que nos ofrece la casa comercial, en este caso se hacen evaluaciones estadísticas de cada una de las pruebas a realizar, así se determina la precisión y el sesgo del análisis.    Mediante el uso de estas soluciones control se puede verificar la calibración de un equipo; se manejan por lo menos dos tipos:

• Control normal:   nivel I
• Control patológico:   nivel II

Se debe utilizar gráficos control ya que permiten determinar el grado de desviación de los controles con respecto a la media, una de ellas es la grafica de Levey – Jennigs.

En el caso del laboratorio, se emplean los siguientes documentos:

 

Control de calidad externo:   permite evaluar el rendimiento del laboratorio; hace parte del control de calidad interno ya que se desarrolla desde un Centro Nacional de Referencia el cual esta encargado de enviar material control a diversos laboratorios y evaluar sus resultados, determinando así el desempeño de cada laboratorio.

En este caso el laboratorio se encarga de contactar las casas comerciales de cada equipo regularmente, cuando estos presentan fallas, ya que estas ofrecen servicio técnico

Laboratorio de Pequeños Animales Universidad Nacional

Para ampliar nuestros conocimientos sobre el laboratorio clínico especializado en hematología, decidimos visitar el Laboratorio de Pequeños Animales de la Universidad Nacional de Colombia en donde nos describieron que tipos de procedimientos desarrollan y con que tipo de equipos cuentan.   En éste caso se hablara sobre el laboratorio de hematología

Procesamiento de la muestra:   Una vez llega el animal por primera vez, lo recibe un estudiante de décimo semestre de medicina veterinaria, éste realiza un diagnóstico que es confirmado por el médico veterinario, de ésta forma se realiza un diagnóstico presuntivo.   Para confirmarlo se hace un formato que contiene:   fecha, historia clínica del animal, nombre del propietario, procedencia, especie, raza, sexo, edad, diagnóstico presuntivo,  nombre del docente y estudiante, y exámenes que solicita.

Al llegar al laboratorio ellos se identifican con ésta solicitud, a menos que sea una remisión.    Primero se debe registrar el procedimiento que se va a desarrollar, éste contiene:  número de 

muestra, prueba específica, clínica de la cual proviene, número de la historia clínica. 

 

 

 

Luego lo primero que se hace es montar cuadro hemático, mientras tanto se centrifugan muestras para extraer el suero y ahorrar tiempo.  Se monta hematocrito y proteínas:   en grandes animales se hacen dos capilares uno para proteínas y hematocrito, otro para fibrinógeno;  se debe resaltar que los capilares siempre se llenan  tres cuartas partes, luego se pasa a la microcentrifuga, siempre se hace hematocrito manual y automatizado.

Glóbulos blancos: 

El proceso es igual que en humanos, así mismo la dilución es de 1/20, se emplea una pipeta de Thoma para diluir los leucocitos:

• Deposita muestra en la pipeta hasta la marca 0.5
• Completa hasta la marca 11 con el reactivo de Turck (ácido acético al 3%)
• Se coloca en un agitador donde se concentra la dilución, siempre se debe homogenizar.   Esta acción tarda tres minutos.   En éste paso logra la hemólisis de los eritrocitos
• Desecha las dos o tres primeras gotas y llena la cámara de Neubauer

  

  SANFORD.  Diagnóstico Clínico por el Laboratorio.  Salvat.  6 Edición.  Pag 121

• Enfoca en aumento de 10x y se inicia el conteo en los cuatro cuadrantes A, B, C Y D.   Se suman las células contadas y se desarrolla la siguiente fórmula: 
•  
  Recuento total Leucocitos:   células nucleadas contadas x 10 x FD                                                                  Área
  
  Recuento total Leucocitos:   células nucleadas contadas x 50/ml
  
  

Plaquetas:

El proceso es igual que en humanos, así mismo la dilución que sería de 1/200, se emplea una pipeta de Thoma para diluir las plaquetas:

• Se llena la pipeta con muestra hasta la marca 1.0
• Se diluye con el reactivo oxalato de amonio al 1% filtrado hasta la marca 101.
  Los reactivos se van haciendo a medida que se necesita.
• Se coloca en un agitador donde se concentra la dilución, siempre se debe homogenizar.   Esta acción tarda tres minutos.   En éste paso logra la hemólisis de los eritrocitos.
  Todas estas diluciones se hacen sin burbujas, espacios, entre otros 
  
• Desecha las dos o tres primeras gotas y llena la cámara de Neubauer.  Luego de hacer el montaje se deja en reposo por 15 minutos en cámara húmeda. 
  
• Se observa en aumento de 40x y se cuenta del cubículo central cinco cuadrantes.   Se realiza la siguiente fórmula:
  Recuento total plaquetas:   células nucleadas contadas x 10 x 200                                                                 1/5
  
  Recuento total plaquetas:   células nucleadas contadas x 10000 ml

Guazzaroni César, Espacio de César:  anajesusa.wordpress.com

Centrifuga:   se emplea con suero, plasma, orina, entre otros.   Para separar:

·         Suero 5 min a 3000 rpm

·         Sedimento urinario 5 min a 2500 rpm

·         Citología 500 rpm a 5 min.   

Microcentrifuga:   se emplea en hematocritos, proteínas. 

Contador de células:    para glóbulos blancos y plaquetas

Microscopios:    se mantiene una biblioteca de láminas de los cuadros hemáticos que se han hecho

Se corroboran los resultados de los equipos con métodos manuales, en el cuadro hemático se realizan laminas cuando hay alarmas

Baño:   se utiliza para obtener el fibrinógeno, se coloca el capilar por 3 min a 57ºC, luego se vuelve a centrifugar.  

 

HEMOANALIZADOR NIHON KOHDEN CELLTAC ALFA

Según la especie esta programado:   caninos, gatos, vacas, ratas, ratones, caballo, cabras.   Se coloca identificación de la muestra la cual debe estar muy bien homogenizada.

DESCRIPCION DETALLADA DEL PRODUCTO

·         País de origen: Japón

·         Pantalla de tipo Touch, Compacta, Pequeña 2 3 cm × 45 cm

·         Consumo bajo de reactivos.

·         Pequeño volumen de muestra

·         Alta reproducibilidad

·         Sistema de acción de alarmas( MEK-6400/6410)

·         Comprobación automática cuando el auto se activa la alimentación. Limpieza automática cuando el poder está apagado.

·         Interfaz intuitiva con un panel táctil en color

Resultados finales:

 Parámetros canino:

• Eritrocitos (10⁸/ul):   5.43 – 8.81
• Hemoglobina (gr/dl):   12.8 – 18.8
• Plaquetas (10³/ul):   140 – 461
• Fibrinógeno (mg/dl):   100-  400
• Reticulocitos (%):   1 – 3

Tiempos de coagulación: 

• APTT (seg):   13.1 – 17.4
• PT (seg):   5.8 – 7.9